**英文标题**：Sensing ceramides by CYSLTR2 and P2RY6 to aggravate atherosclerosis **中文标题**：CYSLTR2和P2RY6感知神经酰胺加重动脉粥样硬化 **发表期刊**：Nature **影响因子**：5.05 **客户单位**：北京大学 **提供服务**：定量脂质组学

研究背景

动脉粥样硬化（Atherosclerosis）是心血管疾病（Cardiovascular Disease, CVD）的主要致病因素之一，占心血管疾病病理的近60%，是心肌梗死和中风的主要根源。近年的研究表明，血液循环中的神经酰胺可作为独立于胆固醇水平的心血管事件预测标志物，特别是长链神经酰胺（如C16:0、C18:0及C24:1）。然而，神经酰胺通过跨膜受体介导信号转导来推动动脉粥样硬化进展的分子机制，仍然是该领域亟待解决的关键科学问题。

研究思路

本研究旨在探讨循环中的长链神经酰胺是否通过激活膜G蛋白偶联受体（GPCR）来加重动脉粥样硬化。研究整合了G蛋白信号的定量分析、GPCR表达的生物信息学分析和NLRP3炎性小体的功能性检测。筛选结果显示CYSLTR2和P2RY6是C16:0神经酰胺诱导炎症小体激活的潜在内源性受体，分别存在于内皮细胞和巨噬细胞中。研究发现，抑制CYSLTR2/P2RY6可以显著减轻神经酰胺导致的动脉粥样硬化。此外，神经酰胺水平的提高与不同程度肾功能损害患者的冠状动脉疾病严重性呈正相关。

主要结果

1. 神经酰胺受体的鉴定

本研究首先建立了小鼠动脉粥样硬化模型，结果表明外源性C16:0神经酰胺显著促进了AAV-PCSK9+HFD处理的小鼠动脉粥样硬化，此效果通过caspase-1敲除或IL-1β中和抗体减弱。体外实验显示，C16:0神经酰胺能显著以浓度依赖的方式上调内皮细胞和巨噬细胞中IL-1β的产生。由此探讨神经酰胺是否通过GPCR激活NLRP3炎症小体，结果显示膜受体Gq可能介导神经酰胺诱导的炎症小体激活，阻止Gq信号的干预能够抑制C16:0神经酰胺诱导的钙释放和IL-1β产生。

2. 神经酰胺体内激活CYSLTR2和P2RY6

本研究运用生物信息学方法鉴定C16:0神经酰胺的受体。从GproteinDb数据库检索出122个Gq偶联GPCR，并筛选出59个在内皮细胞和巨噬细胞共同表达的GPCR。通过Gαq-Gβγ解离测定发现，C16:0神经酰胺能够激活P2RY6和CYSLTR2的Gq信号传导。

3. 神经酰胺-CYSLTR2/P2RY6在动脉粥样硬化中的作用

研究进一步探讨了CYSLTR2和P2RY6在神经酰胺导致动脉粥样硬化中的作用。通过基因敲除及药理学抑制CYSLTR2或P2RY6，可以显著减轻高脂饮食或CKD加重的动脉粥样硬化，并未影响胆固醇或神经酰胺水平，这表明这两个受体共同介导了神经酰胺诱发的动脉粥样硬化。

4. CYSLTR2和P2RY6在CKD-动脉粥样硬化中的作用

过往研究显示慢性肾病（CKD）患者心血管事件发生率显著升高，而现有降脂策略效果有限。通过构建CKD小鼠模型，发现CKD小鼠的血浆中神经酰胺水平升高，且与CAD严重程度成正相关。通过敲除CYSLTR2和P2RY6或药理学抑制来减轻CKD小鼠的动脉粥样硬化斑块形成，暗示神经酰胺可能作为CKD患者ASCVD的潜在诊断标志，靶向CYSLTR2和P2RY6的拮抗剂可能降低CKD患者心血管事件的发生。

5. 神经酰胺-CYSLTR2-Gq复合物的结构

运用单颗粒冷冻电镜（cryo-EM）解析了神经酰胺与CYSLTR2结合的结构机制，结果显示神经酰胺位于CYSLTR2的特定结合口袋中，这一结构为深入了解CYSLTR2如何特异性识别不同类型的神经酰胺提供了基础。

研究小结

本研究重点分析了循环神经酰胺在动脉粥样硬化中的作用机制，发现神经酰胺通过直接结合CYSLTR2和P2RY6来激活Gq信号传导与炎症小体通路，从而加重动脉粥样硬化。抑制这两个受体的活性可显著缓解动脉粥样硬化，且在慢性肾病患者中，血浆神经酰胺水平的升高与冠状动脉疾病的严重程度呈正相关。研究成果表明，以神经酰胺受体作为靶点，可能为未来攻克动脉粥样硬化这项医学难题提供新策略，为患者带来新的希望。我们希望通过**尊龙凯时**的产品，促进相关研究的推广和应用，以实现更佳的医学成果优化与心血管健康改善。